Penerapan pistol gen dalam pembangunan buah

Ceri adalah buah yang relatif tergantung pada iklim. Selama pengembangan buah, pematangan yang diatur oleh asam absisat (ABA).

Dalam studi ini, membungkam gen yang disebabkan virus (VIGS) dan partikel pemboman metode yang digunakan untuk mengidentifikasi empat cDNAs pengkodean 8'-enzim (enzim kunci untuk oksidatif katabolisme ABA) dalam buah-buahan ceri manis. Asam deoksiribonukleat) Paccyp707a1-a4

Paccyp707a2 negatif mengatur buah cherry pematangan, dan paccyp707a1 menengahi toleransi kekeringan

Disebabkan virus gen silencing (VIGS) mengacu pada virus yang menginfeksi tanaman membawa fragmen gen target, yang dapat menginduksi endogen pembungkaman, menyebabkan fenotipik perubahan, dan kemudian mempelajari fungsi gen target berdasarkan fenotipik variasi.

Gambar 1. Perubahan dalam biosintesis ABA (pacnced1), ABA katabolisme (paccyp707as) dan ABA konten yang berhubungan dengan gen selama perkembangan dan pematangan buah ceri manis. () transkrip mutlak tingkat empat pacyp707as selama perkembangan buah. (b) relatif transkrip tingkat terakumulasi oleh pcnced1 dan aba selama pengembangan. Aktivitas ini digunakan sebagai internal control dan ekspresi terdeteksi oleh qrt-pcr.

Ekspresi gen pAccyp707a dalam reaksi dehidrasi

Buah-buahan dikumpulkan dari 32 hari dibagi menjadi dua kelompok, dan tingkat kehilangan air adalah 16% di 45% kelembaban relatif setelah penyimpanan selama 3 hari di bawah kondisi kelembaban relatif yang rendah (45%) dan kelembaban relatif tinggi (100%). ABA konten dan tingkat transkripsi pNCED1 buah-buahan secara signifikan lebih tinggi daripada di kelompok kontrol. Dia mengontrol (gambar 2). Sebaliknya, ekspresi Paccyp707a1 adalah turun-diatur secara signifikan setelah dehidrasi, dan ekspresi Paccyp707a3 juga adalah turun-diatur, meskipun untuk tingkat yang lebih rendah, dan ekspresi Paccyp707a4 dan Paccyp707a2 tidak terpengaruh oleh dehidrasi (Fig. 2). Perubahan yang paling signifikan terjadi dalam ekspresi dari paccyp707a1, yang mungkin menjadi anggota kekeringan-responsif utama paccyp707a gen keluarga selama pematangan buah.

Paccyp707A2 pembungkaman mempromosikan buah pewarnaan dan pematangan

Fenotipe buah dirawat oleh Paccyp707A1/2-RNAi. Pada 28 hari setelah berbunga, 90 buah dipilih dari tiga pohon ceri ditanam di kebun-kebun yang terpisah, dan dibagi menjadi tiga kelompok 30 masing-masing untuk gen virus-induced silencing percobaan.

Paccyp707a1-rnai, paccyp707a2-rnai dan kontrol trv vektor (tanpa gen cyp707a) yang disuntikkan ke dalam pedicels buah dari kelompok 1, 2 dan 3, masing-masing.

Buah dievaluasi 7 hari setelah inokulasi.

() mengobati buah (d) 28 hari setelah berbunga;

(b) 43d untuk mengobati buah;

(c) 43d trv vektor pengobatan buah (tidak cyp707a gen);

(d) d 43 pacyp707a1 RNAi diperlakukan buah;

(e) paccyp707a2 RNAi perawatan buah;

(f) Paccyp707a2 RNAi diperlakukan buah 6 hari setelah perawatan (kanan kontrol);

(g) paccyp707a1 RNAi 6 hari setelah perawatan buah (kontrol buah di sebelah kanan).