5L Continuous Flow Thermostatic Ultrasonic Homogenizer Sonicator

Aplikasi Ultrasonic Homogenizer Sonicator dalam Streptomyces

T: Bagaimana kondisi untuk ultrasonication Streptomyces?

A: Pre-treatment umumnya dikonfigurasikan sebagai konsentrasi suspensi bakteri. Gangguan ultrasonik dilakukan menggunakan pulverizer sel ultrasonik. Kondisi spesifik yang diadopsi saat ini adalah sebagai berikut:

1. Media biakan bakteri 24 jam disentrifugasi pada 5 000 r / menit selama 5 menit untuk mengumpulkan sel.

2. Cuci 3 kali dengan Na2HPO-NaH2PO buffer pH 7.5, lalu campurkan bakteri ke dalam suspensi 1: 3 dengan buffer ini. Ditempatkan dalam tabung plastik besar berukuran 40 mL.

3. Tempatkan tabung plastik besar di dalam pemandian es dan gunakan ultrasonik untuk mematahkan (daya 200 W, 1/2 "probe, hancurkan selama 30 detik, 30 detik berselang).

4. Cairan yang dihancurkan disentrifugasi pada 12 000 r / menit selama 30 menit dengan kecepatan tinggi untuk mengumpulkan puing-puing sel dan supernatan. Prosedur gangguan ultrasonik pada dasarnya sama seperti di atas, yaitu, sel-sel yang dicuci juga dapat didinginkan sebelum fisiologis atau pH 8 Tris. -HCl, cuci sekali. Selain itu, dosis ultrasonik sangat bervariasi dengan jumlah sampel dan bakteri. Daya dapat mencapai 400-600w, melebihi 5 detik, berhenti untuk 5 detik, mandi es, dan menambahkan PMSF dengan konsentrasi akhir 1 mM. Untuk menentukan intensitas dan frekuensi ultrasound yang tepat, perlu untuk mengamati pemeriksaan mikroskopik setiap saat untuk melihat apakah sel-sel benar-benar rusak. Actinomycetes termasuk genus bakteri Gram-positif dengan persentase molar tinggi (G + C) (mol%) pada pohon filogenetik sistem prokariotik. Ketika melakukan E. coli ultrasound, pulverizer sel ultrasonik 400W digunakan, dan metode super 5 stop 5 bagus, tetapi tampaknya tidak berpengaruh pada Streptomyces. Apakah itu karena perbedaan komposisi dinding sel, karena E. coli adalah bakteri Gram-negatif.

Foto Proudct